鱟試驗(yàn)
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檢測(cè)內(nèi)毒素血癥的一種試驗(yàn)。鱟系海邊棲生的一種大型節(jié)肢動(dòng)物,屬蜘蛛綱。其多功能血細(xì)胞(變形細(xì)胞)的溶解物中含有一種可凝性蛋白質(zhì),在極微量內(nèi)毒素(0.0005vg/ml)存在時(shí)可形成凝膠。本試驗(yàn)即利用此原理測(cè)定血液或其他樣品中的微量內(nèi)毒素。在臨床病例,下列疾病陽性率較高:內(nèi)毒素性休克、急性化膿性膽管炎、重癥肝炎、腹膜炎、肝硬化等。內(nèi)毒素檢出陽性病例中約有2/3導(dǎo)致死亡。
鱟試劑是從棲生于海洋的節(jié)肢動(dòng)物“鱟”的蘭色血液中提取變形細(xì)胞溶解物，經(jīng)低溫冷凍干燥而成的生物試劑，專用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)。鱟試劑因能與細(xì)菌內(nèi)毒素及β-葡聚糖反應(yīng)形成凝膠而被廣泛用于檢測(cè)食品、水源、藥品、醫(yī)療器械、動(dòng)物體液等不同樣品中的內(nèi)毒素。使用鱟試劑檢測(cè)的試驗(yàn)稱為鱟試驗(yàn)。根據(jù)鱟試劑反應(yīng)的原理可分為定性鱟試劑和定量鱟試劑，對(duì)應(yīng)的試驗(yàn)稱定性鱟試驗(yàn)和定量鱟試驗(yàn)。定性鱟試驗(yàn)主要用于藥品，醫(yī)療器械等產(chǎn)品的內(nèi)毒素定性檢驗(yàn)。定量鱟試驗(yàn)主要用于檢測(cè)臨床病人、動(dòng)物體內(nèi)內(nèi)毒素等方面，以便為醫(yī)生用藥提供參考。
鱟試驗(yàn)按方法分：
凝膠法
動(dòng)態(tài)濁度法
終點(diǎn)濁度法
動(dòng)態(tài)顯色法
終點(diǎn)顯色法
凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來定性檢測(cè)或半定量內(nèi)毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見規(guī)格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量，使用時(shí)應(yīng)加除熱原水（細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水）復(fù)溶后使用。凝膠法是通過觀察有無凝膠形成作為反應(yīng)的終點(diǎn)。此法操作比較簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)，不需要專用測(cè)定設(shè)備，可以進(jìn)行定性或半定量測(cè)定。
動(dòng)態(tài)濁度法、終點(diǎn)濁度法、動(dòng)態(tài)顯色法、終點(diǎn)顯色法，這四種方法都是定量檢測(cè)內(nèi)毒素的。
根據(jù)檢測(cè)原理，終點(diǎn)濁度法和動(dòng)態(tài)濁度法都屬于濁度法。濁度法系利用檢測(cè)鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中的濁度變化而測(cè)定內(nèi)毒素含量的方法。終點(diǎn)濁度法未見商品化產(chǎn)品。動(dòng)態(tài)濁度法（又稱動(dòng)態(tài)比濁法）是檢測(cè)反應(yīng)混合物的濁度上升某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時(shí)間，或是檢測(cè)濁度增加速度的方法。
終點(diǎn)顯色法和動(dòng)態(tài)顯色法都是屬于顯色基質(zhì)法。顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團(tuán)的多少而測(cè)定內(nèi)毒素含量的方法，根據(jù)產(chǎn)物顏色判斷內(nèi)毒素濃度，又稱為比色法。廈門鱟試劑廠于2005年推出以鱟四肽為顯色底物的鱟試劑盒，抗干擾能力強(qiáng), 靈敏度高達(dá)0.005EU/ml, 質(zhì)量達(dá)到國際領(lǐng)先水平。目前已有500多家單位使用該試劑盒，并有部分單位發(fā)表相應(yīng)文獻(xiàn)。國內(nèi)有少量國外產(chǎn)品，但價(jià)格遠(yuǎn)高于國產(chǎn)試劑，到貨周期長。
如果您僅需要檢測(cè)樣品的內(nèi)毒素限量，可以選擇凝膠法鱟試劑，通過確定內(nèi)毒素限值及最大有效稀釋倍數(shù)，做樣品的干擾試驗(yàn)從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。
如果您需要定量測(cè)定樣品中內(nèi)毒素含量則應(yīng)選擇顯色基質(zhì)鱟試劑盒或動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑。
動(dòng)態(tài)濁度法與動(dòng)態(tài)顯色法需要帶溫育系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)光度測(cè)定儀器及配套軟件，例如，微板鱟試儀ELx808及軟件TALgent 或Gen5。動(dòng)態(tài)濁度法與動(dòng)態(tài)顯色法簡(jiǎn)單方便、一步即成，線性范圍寬。
終點(diǎn)顯色法需要配套酶標(biāo)儀或可見分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)。配套帶有溫育系統(tǒng)的酶標(biāo)儀，如微板鱟試儀ELx808，可減少試劑用量。
目錄 |
標(biāo)本采集
用經(jīng)處理過的，無熱源，無污染試管取血2ml送檢。
正常值范
陰性反應(yīng)。
臨床意義
陽性者，見于標(biāo)本中含有內(nèi)毒素，可認(rèn)為被細(xì)菌污染過。
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