寄生蟲學(xué)/寄生蟲實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保種

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人體寄生蟲學(xué)

寄生蟲學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
- 寄生蟲學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)
- 寄生蟲人工培養(yǎng)
- 寄生蟲實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保種
- 寄生蟲標(biāo)本的保存
- 寄生蟲標(biāo)本的包裝與郵寄

寄生蟲的動(dòng)物保種，是將其感染期接種于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，使蟲體在動(dòng)物體內(nèi)存活，以利于寄生蟲與寄生蟲病的研究、寄生蟲病診斷以及制備教學(xué)標(biāo)本等。

取患者的前述組織穿刺物，用適量生理鹽水稀釋后，注射于田鼠（或金黃地鼠）腹腔內(nèi)，每只鼠注射0.5ml，放籠內(nèi)飼養(yǎng)。一個(gè)月后殺死田鼠，取其肝、脾組織作涂片，染色，鏡檢。轉(zhuǎn)種時(shí)將感染利肝曼原蟲的田鼠解剖，取其肝、脾置于消毒的組織研磨器中或研缽中，加入少量生理鹽水研磨為勻漿后，再加適量生理鹽水稀釋，用消毒注射器吸取稀釋液注射健康田鼠腹腔內(nèi)，每只鼠注入0.2～0.5ml，繼續(xù)飼養(yǎng)。3～4周后，按前述方法進(jìn)行檢查。原蟲在動(dòng)物體內(nèi)可生存數(shù)月。

二、剛地弓形蟲

經(jīng)穿刺抽取病人的腦脊液0.5～1ml，注射于體重18～25g的健康小白鼠腹腔內(nèi)。3周后抽取小白鼠腹腔液作涂片檢查（查滋養(yǎng)體）。如為陰性再取肝、脾、腦組織研磨為勻漿，按1:10量加入無菌生理鹽水稀釋，進(jìn)行第二次接種。如仍為陰性可用同法進(jìn)行2～3次，再觀察結(jié)果。陽性者可作接種傳代，每2周一次，以保種。

接種小鼠，每只注射0.3～0.5ml的勻漿。感染后每天觀察，即抽取腹腔液涂片，染色后觀察。一般感染第四天可見到弓形蟲滋養(yǎng)體。

抽取病鼠腹腔液方法，是在其腹部作一切口，用鑷子夾提腹部的皮膚和腹膜，用1ml注射器吸取1ml生理鹽水，迅速注入腹腔，輕揉腹壁，使生理鹽水和腹腔液混勻，然后再抽出腹腔液檢查。

三、旋毛蟲

將感染旋毛蟲的小白鼠（或大白鼠）殺死，剝皮，取其肌肉；也可取含有幼蟲的豬肉，剪成米粒大小，取1小塊肉置在載玻片上壓片檢查，以含有100～200個(gè)幼蟲囊包量的肌肉，經(jīng)口喂健康小白鼠，喂前應(yīng)饑餓小鼠24小時(shí)；或?qū)⒑杏紫x囊包的肌肉剪碎，置于含有消化液的三角瓶內(nèi)，一般每1g肌肉加入60ml的消化液，置37～40℃溫箱中，經(jīng)10～18小時(shí)（此間經(jīng)常搖動(dòng)燒瓶或攪拌），去掉上層液，然后以水洗沉淀法或離心沉淀法收集幼蟲。以生理鹽水洗滌2～3次，用1ml的注射器和8號針頭吸取100～200條幼蟲，經(jīng)腹腔注射或喂飼健康小白鼠（或大白鼠）。感染第5周后，可在鼠肌中（以膈肌、腿部肌多見）可找到幼蟲囊包。幼蟲在動(dòng)物體內(nèi)可生存3個(gè)月或半年。

四、血吸蟲

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般用18～22g體重的健康小白鼠或2～4kg家兔。

2.尾蚴逸出將陽性釘螺2～3只放入指管（1×7cm）中、加入去氯水或冷開水至管口，管口蓋以銅絲網(wǎng)，以防釘螺爬出。置25℃孵育4～12小時(shí)，尾蚴可陸續(xù)逸出浮于水面。

3.感染動(dòng)物將小白鼠或家兔仰臥固定在木板上，剪去腹毛，范圍約5×5cm約1～2張蓋片大小），用清水洗凈腹部皮膚。用白金耳沾取液面的尾蚴置于蓋玻片上，在解剖鏡下計(jì)算尾蚴數(shù)量。通常感染小白鼠每只條尾蚴，家兔500～800條即可。將含已計(jì)數(shù)尾蚴的蓋片，翻轉(zhuǎn)覆蓋在動(dòng)物腹部的去毛處，使其與皮膚接觸，同時(shí)在蓋片與皮膚之間滴加少許清水，以保持濕潤；冬季應(yīng)保持溫度在25℃左右，15～20分鐘后取下蓋片。感染后約40～45天，即能在動(dòng)物糞便中查到蟲卵。操作中應(yīng)防止感染，用過器材應(yīng)消毒。

五、華支睪吸蟲

常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有貓、犬、豚鼠、大白鼠、兔等。取含有華支睪吸蟲囊蚴的魚肉，用人工消化液消化后收集純凈的囊蚴。將囊蚴拌入飼料喂食或直接從口內(nèi)插入橡皮管注入胃內(nèi)。感染囊蚴的數(shù)量，因動(dòng)物大小而異，以200～400個(gè)為宜。感染后一個(gè)月，即可自糞便內(nèi)檢獲蟲卵。

六、衛(wèi)氏并殖吸蟲

常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有犬、貓。將感染該種吸蟲囊蚴的溪蟹或蝲蛄，放入清水中洗凈后，用研缽或絞肉機(jī)搗碎，經(jīng)篩過濾去除粗殼渣，以沉淀法反復(fù)清洗至水清。吸出沉渣放在雙筒解剖鏡下檢查，用滴管吸取囊蚴并計(jì)數(shù)，將定量囊蚴拌入飼料喂動(dòng)物。也可將囊蚴放入含有2%膽酸鹽溶液中，置40℃1小時(shí)，使后尾蚴脫囊。用無菌生理鹽水洗滌后，給貓或犬進(jìn)行腹腔注射。幼蟲數(shù)量以100～300個(gè)為宜。約2個(gè)月后可在糞便中檢出蟲卵。

注：人工消化液配方

鹽酸　0.4ml胃蛋白酶 25g蒸餾水100ml