寄生蟲學/寄生蟲人工培養
| 醫學電子書 >> 《人體寄生蟲學》 >> 寄生蟲學實驗技術 >> 寄生蟲人工培養 |
| 人體寄生蟲學 |
|
|
|
本書僅介紹三種原蟲的人工培養。
一、溶組織內阿米巴培養。
1.營養瓊脂雙相培養基
⑴固體部分：牛肉浸膏3g；蛋白胨5g；瓊脂 15g；液體1000ml（見“液體部分”）。
⑵液體部分：氯化鈉8g；氯化鉀0.2g；氯化鈣0.2g；氯化鎂0.01g；磷酸氫二鈉2g；磷酸二氫鉀0.3g；蒸餾水1000ml。
制備先配液體部分2000ml，氯化鈣與氯化鎂另裝小瓶，高壓滅菌（壓力6.81公斤20分鐘）后冷卻，合并一起，取1000ml配固體部分，經沸水浴2～3小時，使完全溶解。若有殘渣可用4層紗布過濾除去，趁熱將濾液分裝試管，每管5ml，高壓滅菌，形成斜面，冷卻后放冰箱中備用。接種前，每管加液體部分4.5ml和牛血清0.5ml，并加米粉20mg（用大米粉分裝小管，經180℃烤箱消毒3次）。
⑴培基成分：洛克氏液70ml；滅活血清（每管加0.5ml）；米粉（每管加20mg）；雞蛋4個。
⑵洛克氏（Locke）液：氯化鈉9g；氯化鈣0.2g；氯化鉀0.4g；碳酸氫鈉0.2g；葡萄糖（壓力3.63公斤15分鐘）2.5g；蒸餾水1000ml。
制備先配洛克氏液1000ml，取雞蛋用肥皂水洗刷凈，以70%酒精洗凈后，破殼將蛋黃、蛋清傾入含70ml洛克氏液的小三角燒瓶內，加有玻璃珠，充分搖動使其內含物混合，之后分裝消毒試管內，每管約5ml，置斜位在70℃下經1小時凝固斜面，翌日再置高壓消毒20分鐘。接種前每管加洛克氏液4.5ml、馬血清0.5ml、米粉20mg。
二、陰道毛滴蟲培養
常用肝-胨-糖培養基的培養方法。
1.培養基的配制：15%肝浸液100ml；蛋白胨2g；葡萄糖0.5g。
將以上成分混合，加熱使溶，經濾紙過濾，調節pH至5.5～6.0。每管分裝5ml，8磅20分鐘高壓滅菌，冷卻后，置37℃恒溫箱中24小時，證明無菌后，貯存于冰箱備用。接種前每管加滅能無菌馬血清1ml，即可用。
15%肝浸液的制備：取牛或兔肝15g，洗凈，剪碎如小米粒大小，浸入100ml，蒸餾水中，置冰箱過夜，次日煮沸半小時，用4層紗布過濾除去渣滓，補充蒸餾水至100ml，即成15%肝浸液。
2.培養方法①以無菌棉拭從陰道后穹窿處取分泌物，無菌接種入上述的培養基中；②初次接種和第1、2次轉種時，應加青霉素5～10萬單位/2ml培基；③培養溫度為35～38℃為宜；④pH在5.4～6.8之間。
 寄生蟲學實驗診斷技術 | 寄生蟲實驗動物保種  |
| 關于“寄生蟲學/寄生蟲人工培養”的留言： |  訂閱討論RSS
|
|
目前暫無留言 | |
| 添加留言 | |